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標(biāo)題: 植酸酶檢測(cè)酶活為什么很低，請(qǐng)高手賜教 [打印本頁(yè)]

作者: wy0351 時(shí)間: 2011-1-27 11:29
標(biāo)題: 植酸酶檢測(cè)酶活為什么很低，請(qǐng)高手賜教
我按照國(guó)標(biāo)做的植酸酶測(cè)定，但是酶活總是很低，5000U的測(cè)出來(lái)2000多一點(diǎn)，而且結(jié)果數(shù)據(jù)很不穩(wěn)定，反應(yīng)過(guò)程中標(biāo)準(zhǔn)空白和樣品空白的操作是一樣的嗎？都是先加終止液再加底物的嗎？加入底物后的樣品空白是渾濁的，離心后測(cè)出的吸光值是負(fù)數(shù)，請(qǐng)問(wèn)這個(gè)現(xiàn)象是正常的嗎？拜托高手賜教，感激之至！

作者: lhx 時(shí)間: 2011-1-27 12:31
期待檢測(cè)過(guò)的回答

作者: 馬前卒 時(shí)間: 2011-1-27 14:46
植酸酶含量的檢測(cè)平行性不好！反應(yīng)條件很難控制。

作者: saturnbio 時(shí)間: 2011-1-27 17:56
沒(méi)親手做過(guò)，改天問(wèn)一下檢測(cè)人員。

作者: 極限天空 時(shí)間: 2011-1-28 08:17
本帖最后由極限天空于 2011-1-28 08:19 編輯

1.樣品先加底物,空白先加終止液.
2.控制好PH值和溫度.時(shí)間.
3.國(guó)標(biāo)的檢測(cè)方法不是很好用.
4.有的廠家的植酸酶測(cè)定結(jié)果不大穩(wěn)定.
5.對(duì)檢測(cè)人員的要求比較高,

作者: wy0351 時(shí)間: 2011-1-28 12:30
您好，我想請(qǐng)問(wèn)一下有什么方法測(cè)植酸酶比較好一點(diǎn)呢。我剛接手這個(gè)實(shí)驗(yàn)，以前的人也是按國(guó)標(biāo)做的，我做了幾天發(fā)現(xiàn)國(guó)標(biāo)里好多說(shuō)的很含糊，而且有的感覺(jué)不是很對(duì)，例如偏釩酸銨溶液配制那就有誤導(dǎo)的感覺(jué)，硝酸不能提前加入的，還有，做標(biāo)準(zhǔn)曲線，前面說(shuō)的按無(wú)機(jī)磷的量，而后面給出的公式好像是按濃度來(lái)算的。我現(xiàn)在很迷茫，我的樣品空白老是測(cè)出負(fù)值，不知道原因是什么。我的回歸方程系數(shù)也很低

作者: liyunhuddt 時(shí)間: 2011-2-11 14:16
你如果用標(biāo)準(zhǔn)空白調(diào)零的話，樣品空白是負(fù)值是正常的，用樣品的OD減去空白算木什么影響。我們做的時(shí)候一般用蒸餾水調(diào)零，這樣比較穩(wěn)定。

作者: fm001982 時(shí)間: 2011-2-17 16:32
注意底物，有些植酸鈉配置出來(lái)有可能使PH發(fā)生變化，需要調(diào)整。

作者: 夜飲_客天下 時(shí)間: 2011-7-30 15:02
這個(gè)問(wèn)題解決沒(méi)有？

作者: 361759357 時(shí)間: 2011-8-24 18:26
也許不一定是檢測(cè)的問(wèn)題，可能是植酸酶自身存在問(wèn)題也不一定，本來(lái)植酸酶就及其不穩(wěn)定。

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